Анализ сигнальных каскадов на уровне единичных клеток (Single cell analysis) с использоваднием флуоресцентной микроскопии.

Преподаватель:
П.А. Тюрин-Кузьмин, к.б.н., доцент кафедры биохимии и регенеративной биомедицины ФФМ МГУ имени М.В. Ломоносова

Место проведения: Факультет фундаментальной медицины МГУ имени М.В. Ломоносова, Ломоносовский корпус

Количество человек в группе: 10 человек.

Продолжительность: 1 час вводная лекция и 2 часа практическое занятие.

Необходимый уровень подготовки участников: Необходимо умение работать на флуоресцентном и/или конфокальном микроскопе на базовом уровне. 

Описание мастер-класса:

Культуры стволовых клеток обладают существенной гетерогенностью как морфологической, так и функциональной. Диапазон функций, которые способна осуществлять конкретная клетка популяции, находится в тесной взаимосвязи с тем, какие сигнальные молекулы эта клетка может зарегистрировать и ответить на них. Внутриклеточную сигнализацию стволовых клеток, активируемую гормонами, факторами роста и другими сигнальными молекулами, необходимо изучать на уровне одиночных клеток, а не тотальной популяции.
В данном мастер-классе в его теоретической части будут приведены убедительные доказательства необходимости перехода изучения внутриклеточной сигнализации стволовых клеток на уровень одиночных клеток, будут приведены примеры решаемых этими методами задач,будет приведен перечень минимально необходимого оборудования для проведения анализа такого рода. В практической части мастер-класса будет продемонстрирована работа станции для флуоресцентной прижизненной микроскопии на базе микроскопа Nikon Eclipse Ti. На клетках иммортализованной линии TERT hMSC (мезенхимные стволовые/стромальные клетки, выделенные из жировой ткани человека) будет продемонстрирована регистрация сигнальных ответов клеток на аппликацию гормонов на уровне одиночных клеток.

Используемое оборудование: Микроскоп Nikon Eclipse Ti

Ожидаемые результаты:

Слушателям необходимы базовые навыки работы на флуоресцентном и/или конфокальном микроскопе. По результатам МК слушатели получат доказательства необходимости перевода изучения внутриклеточных сигнальных каскадов на уровень одиночных клеток. Слушатели узнают, какие методики изучения сигнальных каскадов на уровне одиночных клеток разработаны и внедрены в широкую практику на сегодняшний день, получат знания о достоинствах и недостатках различных методик, о возможных ошибках и артефактах, встречающихся при проведении данного типа исследований. Слушатели примут участие в реальном эксперименте по выяснению особенностей ответов индивидуальных клеток на гормональную стимуляцию и получат базовые навыки по пользованию флуоресцентным микроскопом для регистрации сигнальных каскадов на уровне одиночных клеток.

Ключевые публикации преподавателей Школы:
https://doi.org/10.1038/srep32835
https://doi.org/10.1016/j.cmet.2020.02.003
https://doi.org/10.1016/j.scr.2017.10.022
https://doi.org/10.1134/S1990747813050085